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摘要：咬合因素在口颌系统疾病发生、进展及转归中的作用一直是国内外相关领域探讨的重点,多数探讨结果证实:咬合状态的异常转变可以引起咀嚼肌及颞下颌关节(temporomandibular joint,TMJ)等口颌系统结构的功能紊乱症状,甚至在超出机体适应能力的情况下引发病理性损伤。咬合垂直距离(occlusal vertical dimension, OVD)转变是导致咬合状态异常变化的诱因之一,适合稳定的咬合垂直距离是咀嚼肌充分发挥咀嚼效能及维持颞下颌关节功能正常的重要保证,其异常转变会对咀嚼肌的结构及功能发挥产生直接影响。咬肌(masseter muscle)作为咀嚼肌群中最主要的升颌肌,其功能的发挥与咬合垂直距离直接相关,特殊的解剖部位决定了其与咬合垂直距离的密切联系,咬合垂直距离的稳定性对于维持咬肌正常的组织结构和功能具有重要作用。国内外已开展咬合垂直距离转变对口颌系统健康影响的相关方面探讨,但探讨热点主要集中在如何正确评估及合理恢复OVD的临床策略学探讨,以及升高OVD对咀嚼系统各部分影响的基础及临床实验性探讨,有关OVD降低对咀嚼系统组织结构及功能影响的相关方面探讨仅限于临床观察性及检测性实验,相关证据性基础实验探讨鲜见报道。本探讨试图通过建立OVD降低大鼠动物模型,利用组织病理学、酶组织化学及生物化学检测等技术对OVD降低后大鼠咬肌形态结构、酶组织化学特性及能量代谢的相应反应展开综合探讨。探讨目的:建立OVD降低大鼠动物模型,利用相关实验技术手段观察浅析大鼠咬肌的显微形态、超微结构、酶组织化学特性及能量代谢变化规律,进行组间的横向比较及不同时间观察点之间的纵向比较探讨,以期进一步了解OVD降低后咬肌结构及功能的反应性及适应性变化,为相关临床体现及临床治疗手段提供实验性论述支持。探讨策略:1.选用成年SD大鼠作为模型动物,采取人为机械性降低大鼠牙列段高度的策略诱导OVD降低,设置实验组与操作对照组,根据实验观察节点各组再分为3天、10天、30天、60天四个亚组。2.利用冷冻切片及超薄切片技术制作咬肌组织标本,通过光学显微镜和透射电镜(TEM)进行显微形态及超微结构的观察浅析。3.利用酶组织化学技术对咬肌组织进行NADH-TR特殊酶染色,借助显微图像浅析系统计算浅析咬肌各型肌纤维的mCSA(平均横截面积)及百分构成比变化。4.采取化学比色法,利用酶活性试剂盒测定咬肌组织内Ca~(2+)- ATPase、Na~+- K~+- ATPase活性值并行定量浅析。探讨结果:1.模型特点出现迅速,可控性及稳定性好,具备可重复性;实验动物体重、生活习性、行为体现未受影响。2.咬合垂直距离降低可以引起大鼠显微及超微结构的转变,其中以超微结构的损伤性体现为主,线粒体的结构性破坏为典型特点,OVD降低10天后,可观察到显著的空泡样变性线粒体,伴有嵴断裂、基质密度降低;OVD降低30天后观察到了典型的线粒体内髓鞘样变,尽管损伤程度较重,但仅局限于个别线粒体,范围局限;至实验第60天时,超微结构已趋向正常体现,前期的损伤性体现消失。3.实验60天组大鼠Ⅱa型肌纤维平均截面积(mCAS-2a)显著小于实验3天组和同期操作对照组(p﹤0.05);实验60天组Ⅱb型肌纤维平均截面积(mCAS-2b)显著大于实验3天组和同期操作对照组(p﹤0.05);实验60天组Ⅱb型肌纤维所占百分构成比显著高于实验3天组与同期操作对照组(p﹤0.05)。说明咬肌发生了肌纤维横截面积的适应性改建,并且有着不同类型肌纤维之间的类型转换,但改建特点在实验的后期才具显著性,说明改建的发生需要一定时间。4.咬合垂直距离降低后大鼠咬肌组织的Ca~(2+)-ATPase、Na~+- K~+- ATPase活性出现短时间内的降低,实验30天时下降显著,至实验第60天时酶活性又恢复至接近正常水平,与同期对照组相比差别无显著性,以上结果说明OVD降低可以引起咬肌的能量供应不足,但随着状态持续时间的延长酶活性可以得到恢复。结论:咬合垂直距离降低可以导致大鼠咬肌局限性的超微结构损伤及短时间内的能量代谢障碍,但随着状态持续时间的延长,肌纤维发生了形态结构的功能适应性改建,超微结构的损伤性体现消失,能量代谢亦恢复正常。关键词：咬合垂直距离论文动物模型论文咬肌论文超微结构论文肌纤维类型论文能量代谢论文
缩略语表5-7
中文摘要7-11
ABSTRACT11-15
前言15-17
文献回顾17-31
1.咬合与口颌系统健康17-19
2. 咬合垂直距离转变对口颌系统健康产生的影响19-24
3. 咬合垂直距离与咬肌的解剖学及生理学联系24
4. 骨骼肌的解剖、生理学特性及功能、代谢相关方面探讨24-31
实验一 咬合垂直距离降低大鼠动物模型的建立31-38
1 材料31-32
2 策略32-33
3 结果33-36
4 讨论36-38
实验二 咬合垂直距离降低对大鼠咬肌显微及超微结构影响的实验探讨38-45
1 材料38-39
2 策略39-41
3 结果41-42
4 讨论42-45
实验三 咬合垂直距离降低后大鼠咬肌的酶组织化学定量探讨45-52
1 材料45-46
2 策略46-47
3 结果47-50
4 讨论50-52
实验四 咬合垂直距离降低对大鼠咬肌能量代谢影响的实验探讨52-58
1 材料52
2 策略52-54
3 结果54-56
4. 讨论56-58
小结58-60