本站原创
摘要：[探讨目的]本论文将非洲爪蟾染毒不同浓度的阿特拉津,在2个不同时间点进行取样,浅析和探讨阿特拉津对西栖类存活和发育的毒性。运用全基因组表达谱芯片技术筛选性腺组织的敏感基因和对性腺产生发育毒性可能有着的细胞信号通路；运用Real time RT-PCR技术浅析阿特拉津对肝脏相关基因表达的影响,探讨阿特拉津对非洲爪蛾肝脏的毒性作用。运用以上两种策略初步探讨阿特拉津对非洲爪蟾发育毒性作用的机制。[探讨策略]本次实验设对照组和4个阿拉津染毒组,分别是0.1、1、10和100μg/I.组,每组随机挑选30只非洲爪蟾蝌蚪。实验结束时,取非洲爪蟾的性腺和肝脏组织,进行称重和基本形态观察,并迅速置于液氮中保存。运用非洲爪蟾全基因组表达谱芯片和Real time RT-PCR技术,对性腺组织进行敏感基因和细胞信号通路的筛选,对肝脏组织进行相关基因表达的探讨。[探讨结果]1阿特拉津对非洲爪蟾一般生长发育情况的影响阿特拉津对非洲爪蟾的体长、体重、性腺重没有显著影响(p0.05),0.1、1、10μg/L组的肝脏重量显著降低(p0.05)；10、100μg/L染毒组肝脏系数有所升高(p0.05)：0.1和100μ/L阿特拉津组的蝌蚪完成变态的时间较长于其他组,但差别无显著性(p0.05)；变态完成后,性别比没有发生显著变化(p0.05)；0.1、1、10和100μg/L剂量组均有雄性性腺出现不连续发育,有着不同程度的断裂。2阿特拉津对雄性非洲爪蟾性腺敏感基因和细胞信号通路的筛选通过GO浅析,在分子功能、生物历程和细胞组成三个部分获得了差别基因聚集的多条功能条目。通过Pathway浅析,我们得到了6条差别显著的细胞信号通路,分别是精氨酸和脯氨酸能量代谢通路、细胞周期通路、剪接体通路、碱基切除修复通路、核黄素代谢通路和孕酮介导的卵母细胞成熟通路。3阿特拉津对非洲爪蟾肝脏相关基因表达的影响阿特拉津使100μg/L组雄性非洲爪蟾的AR水平显著增高(p0.05),使100μg/L组非洲爪蟾HSP90表达水平显著升高(p0.05)，而对VTG、ER、HSP70和GR的表达水平无显著性影响(p0.05)。[探讨结论]1阿特拉津使0.1、1、10μg/L组非洲爪蟾的肝脏重量显著降低,10、100μg/L染毒组肝脏系数有所升高,对其他一般生长情况无显著影响；阿特拉津在一定程度上抑制了非洲爪蟾蝌蚪的变态；性别比没有显著变化；各组均有发育不连续的雄性性腺,出现异常节段。2阿特拉津对雄性非洲爪蟾性腺产生发育毒性可能与6条细胞信号通路相关,分别是精氨酸和脯氨酸能量代谢通路、细胞周期通路、剪接体通路、碱基切除修复通路、核黄素代谢通路和孕酮介导的卵母细胞成熟通路。G0浅析后获得差别功能聚集的多条功能条目。3阿特拉津使100μg/L组雄性非洲爪蟾肝脏内AR水平显著增高,使100μg/L组非洲爪蟾HSP90表达水平显著升高,而对VTG、ER、HSP70和GR的表达水平无显著性影响。关键词：阿特拉津论文非洲爪蟾论文发育论文基因芯片论文RT-PCR论文
导师介绍5-7
主要符号表7-8
摘要8-10
ABSTRACT10-12
前言12-15
第一部分 阿特拉津对非洲爪蟾生长发育和性腺发育的影响15-21
材料与策略15-17
结果17-19
讨论19-20
小结20-21
第二部分 阿特拉津对雄性非洲爪蟾性腺敏感基因和细胞信号通路的筛选21-44
材料与策略21-28
结果28-35
讨论35-43
小结43-44
第三部分 阿特拉津对非洲爪蟾肝脏相关基因表达的影响44-57
材料与策略44-49
结果49-53
讨论53-56
小结56-57
结论57-58