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厚朴挥发性成分HSSPMEGC指纹图谱建立

收藏本文 2024-01-15 点赞:26378 浏览:120087 作者:网友投稿原创标记本站原创

摘要:厚朴(Magnopae officinaps Cortex)为木兰科植物厚朴(Magnopa officinaps Rehd.et Wils.)及凹叶厚朴(Magnopa officinaps Rehd. et Wils.var. biloba Rehd. et Wils.)的干燥干皮、枝皮和根皮。本课题以厚朴为研究对象,采集和购写了多批不同产地或部位的厚朴药材共15批,顶空-固相微萃取-气相色谱法(HS-SPME-GC)对其成分分析,并顶空-固相微萃取-气相色谱-质谱(HS-SPME-GC-MS)的鉴定结果,建立其中药色谱指纹图谱。聚类分析、度分析的结果对其品质评价。同时为了比较不同方法及不同化学模式之间的异同,高效液相色谱法(Hplc)反映不同批次厚朴化学本质差异的数量化特征,为厚朴的质量控制科学的、系统的评价依据。1.对HS-SPME-GC法分析厚朴挥发性成分的萃取条件和色谱条件优化。考察不同条件下出峰个数和总峰面积的变化差异,对不同涂层的SPME商用萃取头、萃取温度、萃取时间和样品用量等影响因素优化,结果:PDMS/DVB萃取头,取厚朴粉末0.2g在70℃恒温条件下萃取60min,可达到较好的萃取效率;同时也对色谱柱、升温程序、流速、分流比等分离因素了条件优化,筛选出HP-50毛细管柱(30 m×0.32mm×0.25μm),程序升温:50℃(1min),以4℃/min上升到140℃(2min),以2℃/min上升到180℃,以12℃/min上升到280℃(5 min),流速1.3 ml/min,分流比为15:1的色谱条件较适合建立厚朴药材的中药色谱指纹图谱。2.按上述优化条件对不同产地或不同部位的15批厚朴药材批量分析,共42个共有色谱峰,并经HS-SPME-GC-MS鉴定确认了15个组分。以喇叭茶醇为内参照峰,建立指纹图谱。聚类分析,15批次药材被分成4类。其中1、2类为推荐品,选取其中10个批次建立共有模式,并计算生成的对照图谱与15个批次之间的度,结果各批次的度均在0.9以上,未发现离群样品,而其中11号批次因保存不当导致挥发性成分流失,其聚类结果在类、度在15个批次中最低,与实际情况相符,所以本研究所的HS-SPME方法适合于中药材GC指纹图谱的建立。3.对21个批次厚朴的主要药效成分厚朴酚和和厚朴酚比较分析,建立其共有模式,以厚朴酚、和厚朴酚为考察指标,用系统聚类分析对其化学模式识别研究。21批药材被分为4类,其中1类为推荐品,较好的反映了不同产地的厚朴酚性成分的差异。与厚朴药材GC指纹图谱比较,未发现厚朴药材GC指纹图谱的分析结果与其主要药效成分含量的差异性之间的关联。关键词:厚朴论文挥发性成分论文HS-SPME论文GC论文GC-MS论文Hplc论文指纹图谱论文

    摘要6-8

    Abstract8-11

    前言11-13

    章 综述13-36

    1 中草药挥发性成分的研究进展13-15

    1.1 中草药挥发性成分的分类13-14

    1.2 中草药挥发性成分的应用14-15

    2 厚朴的研究15-22

    2.1 厚朴的产地15

    2.2 厚朴的分类15-16

    2.3 中药厚朴的成分16

    2.4 中药厚朴的药理作用16-17

    2.5 厚朴成分的研究进展17-22

    3 中药指纹图谱研究22-28

    3.1 中药指纹图谱的定义22

    3.2 中药指纹图谱的特点22-23

    3.3 中药指纹图谱的研究23

    3.4 中药指纹图谱的构建方法23-24

    3.5 中药指纹图谱的建立24-25

    3.6 参数的建立25-26

    3.7 中药指纹图谱方法的验证26-27

    3.8 气相色谱指纹图谱在中药挥发性成分研究中的应用27-28

    3.9 厚朴的指纹图谱的研究进展28

    4 中草药挥发性成分的分析进展28-32

    4.1 中草药挥发性成分的提取方式28-31

    4.2 中草药挥发性成分的分离检测技术31-32

    5 固相微萃取技术及研究进展32-35

    5.1 固相微萃取技术的介绍和研究进展32

    5.2 萃取涂层的种类32-33

    5.3 萃取效率的影响因素33-34

    5.4 固相微萃取技术的特点34-35

    6 立题依据35-36

    章 色谱分离条件与萃取条件的优化36-50

    1 仪器和试剂36-37

    2 样品和预处理37

    3 色谱条件37

    4 厚朴挥发油的制备37-38

    5 HS-SPME-GC方法38

    6 色谱分离条件的优化38-44

    6.1 色谱柱的选择38-39

    6.2 升温程序的筛选39-42

    6.3 分流比的筛选42-44

    6.4 流速的筛选44

    7 萃取条件的优化44-48

    7.1 萃取涂层的优化44-45

    7.2 萃取温度的优化45-46

    7.3 萃取时间的优化46-47

    7.4 样品用量的优化47

    7.5 进样口温度的优化47-48

    7.6 HS-SPME-GC方法的确定48

    8 讨论48-50

    8.1 色谱分离分析的优化48

    8.2 HS-SPME的萃取条件的优化48-50

    章 HS-SPME-GC法建立厚朴的指纹图谱50-60

    1 仪器和试剂50-51

    2 样品的及预处理51

    3 顶空固相微萃取气相色谱法指纹图谱的建立51-58

    3.1 色谱条件51-52

    3.2 GC和GC-MS测定方法52

    3.3 方法学考察52-53

    3.4 厚朴药材指纹图谱共有模式的建立和结果53-56

    3.5 GC-MS的测定结果56

    3.6 指纹图谱参照峰的确定及共有特征峰确定56

    3.7 系统聚类分析56-57

    3.8 度分析57-58

    4 结果与讨论58-60

    章 厚朴药材酚性成分在各产地中的差异比较60-66

    1 仪器、试剂与对照品60

    2 样品和预处理60-61

    3 厚朴中厚朴酚与和厚朴酚含量同时测定61-64

    3.1 色谱条件61-62

    3.2 检测波长的选择62

    3.3 系统适用性试验62

    3.4 供试品溶液的制备62

    3.5 对照品的制备62

    3.6 测定方法62-63

    3.7 聚类分析结果63-64

    4 结果与讨论64-66

    结语66-67

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