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杏树氮离子注入转化抗寒基因初步

收藏本文 2024-04-05 点赞:6163 浏览:21035 作者:网友投稿原创标记本站原创

摘要:杏是我国古老栽培树种之一,分布范围很广,用途极为广泛,经济效益很高。杏树极易成花,但其开花早,易遭晚霜危害,轻则造成减产,重者绝收,因此杏常有“十年九不收”之说。据调查,北方杏主产区,造成杏年际产量不稳的主要因素是冻花。本研究分别以优良品种金太阳、美特杏和凯特杏作为试材,氮离子注入法将沙冬青抗寒基因(AmGS)导入体内,取得结果如下:1杏品种与N~+浓度对嫁接成活率有的影响。不同的因素对变异率的影响也不相同, N~+浓度越高变异率较高, DNA浸沾40 min效果较好。不同组合处理对茎节长度的影响差异不太,大数值在1.3cm左右。处理后叶片有变化,低浓度N~+处理对叶片的生长影响不大,叶片的变异随N~+浓度增大而加大,叶片出现畸形或开裂,严重者影响了正常的生长发育。N~+处理后的坐果率较低,品种间差异,其他处理影响不大,果实发育的差异在处理间表现不,甜度差异也比较不。2 N~+注入转化外源基因分子检测分析可知,N~+浓度关系对转化率的影响最大,三个因素对转化率的影响大小分别为N~+浓度DNA浸沾时间品种,N~+浓度越高,浸沾DNA的时间短,转化率越高。3从转基因变异株系抗寒性生理测定结果,转化抗寒基因的变异植株在低温处理下电导率低于对照且温度降低差异变大,半致死温度LT50降低,膜保护性酶活性增加,可溶性蛋白质、游离脯氨酸含量增加和丙二醛含量的下降,代表转化植株抗寒性提高。4转基因杏果实对环境影响,经对鸡群与羊群饲喂,发现病症,检测血常规,淋巴细胞比率,中间细胞比率都增加,而中粒细胞、粒细胞增加,可能动物取食水果对肠胃有些影响,使得动物体自身免疫功能增强,并未对动物造成病害。关键词:杏论文抗寒基因论文氮离子注入论文

    摘要4-5

    Abstract5-9

    章 综述9-16

    1.1 问题的9

    1.2 果树抗寒生理研究9-10

    1.3 国内外转基因研究进展10-14

    1.3.1 果树转基因研究进展10-13

    1.3.2 氮离子注入转化抗寒基因13-14

    1.4 的研究目的和内容14-16

    章 与方法16-23

    2.1 试验地概况16

    2.2 试验16-19

    2.2.1 目的基因的构建16-19

    2.2.2 转化受体19

    2.3 试验方法19-23

    2.3.1 试验设计19-20

    2.3.2 离子注入的方法20

    2.3.3 转化植株生长的调查20-21

    2.3.4 PCR 分子检测21

    2.3.5 转基因株系抗寒性生理测定21-22

    2.3.5.1 人工冷冻处理21-22

    2.3.5.2 电导率和半致死温度 LT50 的测定22

    2.3.5.3 过氧化物酶活性的测定22

    2.3.5.4 超氧化物歧化酶活性的测定22

    2.3.5.5 可溶性蛋白含量的测定22

    2.3.5.6 脯氨酸含量的测定22

    2.3.5.7 丙二醛含量的测定22

    2.3.6 转基因果实对牲畜安全性检测22-23

    章 结果与分析23-44

    3.1 N~+注入转化抗寒基因对杏生长的影响23-34

    3.1.1 N~+注入基因转化对枝条嫁接成活率及变异率的影响23-24

    3.1.2 N~+注入基因转化对枝条生长的影响24-25

    3.1.3 N~+注入基因转化对叶片生长的影响25-30

    3.1.4 N~+注入基因转化对坐果率的影响30-31

    3.1.5 N~+注入基因转化对果实大小的影响31-33

    3.1.6 N~+注入基因转化对果实含糖量的影响33-34

    3.2 N~+注入基因转化分子检测34-35

    3.3 转基因变异株系抗寒性生理测定35-41

    3.3.1 低温处理对细胞膜透性和半致死温度 LT_(50)的影响35-36

    3.3.2 低温处理对膜保护性酶 SOD、POD、CAT 活性的影响36-38

    3.3.3 低温处理对可溶性蛋白质含量的影响38-39

    3.3.4 低温处理对游离脯氨酸含量的影响39-40

    3.3.5 低温处理对 MDA 含量的影响40-41

    3.4 转基因果实安全释放检测41-44

    章 44-45

    第五章 讨论45-47

    附图47-49

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