摘要:目的探讨人羊膜上皮细胞(human amniotic epithepal cells, hAECs)移植入兔损伤声带组织内的生长分布特点,探讨hAECs推动损伤声带修复再生的潜能。策略分离和培养人羊膜上皮细胞,利用慢病毒载体将增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, EGFP)基因转染至hAECs内。建立深及声韧带的兔声带损伤模型,设hAECs移植组即实验组(13侧声带)、损伤对照组(13侧声带)及正常对照组(4侧声带)。荧光显微镜下连续观察hAECs在声带内的存活、分布情况,免疫荧光染色观察hAECs在声带固有层内的分化情况。运用HE染色和免疫组化染色浅析胶原纤维、纤维连接蛋白等主要细胞外基质在损伤后3月时的含量及分布。结果hAECs原代培养6d后呈铺路石样生长,移植入兔损伤声带组织后可在固有层内持续存活2个月,细胞呈纵向排列,有趋向性。声带损伤2月时,免疫荧光显示hAECs移植组肌细胞标志蛋白Dein荧光阳性,提示hAECs向肌细胞分化。光镜观察下见hAECs移植后3个月,兔声带内胶原纤维密度和排布较损伤对照组改善,但未及正常。免疫组化染色示hAECs移植组纤维连接蛋白含量和分布介于损伤对照组和正常对照组之间。结论hAECs可在异种动物声带损伤组织内持续存活、生长,并有向声带组织分化的潜能,可推动声带损伤后的修复再生。关键词:声带论文创伤和损伤论文人羊膜上皮细胞论文移植论文异种论文细胞移植论文兔论文
中英文缩写对照4-5
摘要5-6
英文摘要6-7
前言7-11
实验流程图11-12
第一部分:声带损伤模型的建立及实验分组12-17
1.材料12
2.实验步骤12
3.结果12-15
4.讨论15-16
5.结论16-17
第二部分:人羊膜上皮细胞的分离、培养及生物学标记17-22
1.材料17
2.实验步骤17-18
3.结果18-20
4.讨论20-21
5.结论21-22
第三部分:人羊膜上皮细胞在声带内的存活及分化22-27
1.材料22
2.实验步骤22
3.结果22-25
4.讨论25-26
5.结论26-27
第四部分:声带组织学观察27-34
1.材料27
2.实验步骤27-28
3.结果28-32
4.讨论32-33
5.结论33-34
全文总结34-35