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摘要：日本血吸虫病(Schistosomiasis japonicium)是一种严重危害人、畜健康,影响社会和经济进展的人、畜共患寄生虫病。上世纪50年代以来,我国血吸虫病防治工作取得了举世瞩目的成就,但由于钉螺孳生环境难以得到根本转变,药物灭螺效果难以持久和巩固,并可能造成生态环境污染；长期利用吡喹酮进行扩大化疗,有产生耐药性的危险。作为灭螺、药物防治和其他综合防治措施的重要补充：血吸虫病疫苗的探讨就显得十分必要。迄今研制的一些日本血吸虫疫苗保护效果还不够理想,探讨疫苗候选分子的免疫保护机制,筛选理想的免疫佐剂是提升疫苗保护效果的有效途径之一。本论文以BALB/c小鼠作为实验动物模型,运用两种纯化的日本血吸虫重组表膜蛋白LHD-Sj23和SjTSP2与3种佐剂(弗氏佐剂、ISA206佐剂、ISA70M佐剂)配伍免疫小鼠,3次免疫后,各组小鼠经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴40±2条,感染6周后,经肝门静脉灌注法收集成虫,检测每克肝脏虫卵数,计算减虫率和肝脏减卵率。初步试验结果显示重组抗原LHD-Sj23结合三种佐剂免疫小鼠后都诱导了较高的免疫保护效果。重组抗原SjTSP2的免疫保护效果与利用的佐剂有关,其中ISA206佐剂组获得的保护效果最高,弗氏佐剂组次之,ISA70M佐剂组没有保护作用。为探讨这两种重组抗原诱导产生的免疫保护机制,本论文通过流式细胞术检测了3次免疫后1周的小鼠的CD4+、CD8+细胞,及IL2、IL4、IL10、IFNγ等细胞因子的变化情况。通过ELISA策略检测免疫前、第3次免疫小鼠1周后以及尾蚴攻击6周后血清中的特异性抗体IgG及其亚型IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3,和IgE、IgA、IgM的变化情况。初步实验结果显示,与空白对照组相比,免疫组小鼠CD4+、CD8+细胞的数值以及CD4+/CD8+比值,细胞因子IL2、IL4、IL10、IFNy水平都有不同程度的变化,免疫组的小鼠机体诱导产生了Th1/Th2型混合的细胞免疫反应,其中Thl型免疫应答占优势地位。同时,免疫组小鼠诱导产生了较为强烈的体液免疫应答,抗体水平显著上升的类型有IgG、IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG3,显示体液免疫应答可能在小鼠抵抗血吸虫感染历程中也发挥了重要作用。本实验结果表明重组抗原LHD-Sj23和SjTSP2诱导的免疫保护效果是细胞免疫和体液免疫共同作用的结果。本论文为深入探讨这两种抗日本血吸虫病候选疫苗的免疫机制提供了有一定价值的实验数据。关键词：日本血吸虫论文LHD-Sj23论文SjTSP2论文T细胞论文细胞因子论文抗体论文
摘要6-8
ABSTRACT8-10
英文缩略表10-11
前言11-13
第一篇 文献综述13-41
第一章 血吸虫病疫苗的探讨进展13-25
1 血吸虫病疫苗的研制对策13-19
1.1 虫源性疫苗13-14
1.2 亚单位疫苗(基因重组抗原疫苗与核酸疫苗)14-17
1.3 表位疫苗17-18
1.4 多价疫苗或多基因疫苗18-19
1.5 “内影像”抗原——抗独特型抗体19
2 血吸虫病疫苗探讨的不足及展望19-20
421.4 主要试剂配制42-44
2 实验策略44-47
2.1 基因重组抗原制备44-46
2.2 重组蛋白免疫BALB/c小鼠试验46-47
2.3 小鼠的攻击感染和减虫率,减卵率的计算47
3 结果47-50
3.1 诱导目的蛋白的表达与纯化47-49
3.2 动物免疫保护试验结果49-50
4 讨论50-52