摘要4-6
ABSTRACT6-8
缩略词表8-13
第一章 TORQUE TENO SUS VIRUS(TTSUV)的探讨进展13-27
1 TTV和TTSuV的发现13-14
2 TTV和TTSuV的分类14-16
3 TTV和TTSuV的病原学特点16-18
3.1 理化性质16
3.2 基因组特点及编码蛋白功能16-18
4 TTSuV的遗传变异18-19
5 流行病学19
6 疾病相关性19-21
7 TTSuV实验室诊断策略21-26
7.1 TTSuV分子生物学的检测策略21-23
7.2 TTSuV分型的检测23-24
7.3 TTSuV的血清学诊断法24
7.4 病理组织学诊断24-25
7.5 动物模型的建立25-26
8 本探讨的目的和作用26-27
第二章 四川省TTSUVS的分子流行病学调查27-49
前言27-29
1 材料和策略29-35
1.1 菌株和载体29
1.2 病料来源29
1.3 主要试剂及溶液配制29-30
1.3.1 主要试剂29
1.3.2 溶液的配制29-30
1.4 主要仪器30-31
1.5 病毒总DNA的抽提31
1.6 PCR物设计和合成31-32
1.7 PCR扩增32
1.8 PCR扩增产物的回收纯化32-33
1.9 TTSuV1和TTSuV2部分UTR的克隆33
1.9.1 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备33
1.9.2 PCR产物的连接33
1.9.3 重组质粒的转化33
1.10 重组质粒的鉴定33-35
1.10.1 重组质粒的筛选33-34
1.10.2 重组质粒的PCR鉴定34
1.10.3 目的基因的序列测定浅析和序列提交34-35
1.11 TTSuV部分UTR序列在分子系统学中运用的可能性评价35
1.12 系统发生数的构建35
2 结果35-45
2.1 部分猪场样品TTSuVs的PCR检测结果35-38
2.2 TTSuV UTR作为分子标记的评价38-40
2.3 基于TTSuV部分UTR的序列比对和系统进化浅析40-45
3 讨论45-48
3.1 引物选择45
3.2 流行病学45-47
3.3 基因分型47
3.4 分子标记UTR47-48
4 小结48-49
第三章 TTSUV2型的病理组织学观察49-61
前言49
1 材料和策略49-51
1.1 实验动物49
1.2 毒株和细胞49-50
1.3 实验试剂50
1.4 实验仪器50
1.5 单一TTSuV2病毒感染因子的获得50-51
1.5.1 对囊膜病毒的处理50-51
1.5.2 感染性有囊膜病毒的细胞分离鉴定51
1.5.3 常见猪病毒核酸的PCR检测51
1.6 TTSuV2病毒DNA载量的测定51
1.7 实验设计51
2 结果51-57
2.1 病毒载量的测定51-52
2.2 病理组织学观察52-57
3 讨论57-60
3.1 TTSuV2单一感染因子的获得和TTSuV2阴性猪的筛选57-58
3.2 TTSuV2感染引起的病理损伤58
3.3 TTSuV在其他相关疾病中的作用58-60
4 小结60-61
第四章 结论与革新点61-62
1 结论61
1.1 流行病学调查61
1.2 病理组织学观察61
2 革新点61-62