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摘要：目的：建立离体人胎盘单绒毛叶双向灌注模型，进一步探讨探讨国产的胎盘转移特点。建立高效液相色谱串联质谱检测法测定药物浓度，为临床探讨药代动力学提供策略学。策略：选取健康足月行剖宫产术的初产妇10位，取得娩出10min内的胎盘，采取4℃含肝素的Krebs-Ringer（KRB）缓冲液（PH=7.4，肝素浓度为25IU ml-1）经脐动脉注入并在胎盘母体面直接喷射，对胎盘进行灌洗，以保存胎盘的功能并防止胎盘内血液凝固。选取灌注较好且无缺损的胎盘小叶，用小儿套管针进行插管，结扎胎盘小叶动静脉的分支。继续用KRB缓冲液进行灌注，当动脉灌注量和静脉回收量相等时，表明胎盘无渗漏，将其放置在事先准备好的灌注格内，母体面朝上，将装有胎盘小叶的灌注格放入恒温水浴槽中。实验开始前，胎儿侧循环的灌注液流速设定为（1-3ml/min），使灌注压力保持在（60-75mmHg），母体侧循环的灌注液流速设定为（10-12ml/min），以而提供（35-45mmHg）的灌注压。模型建立后，两侧循环持续灌注30min，使胎盘循环稳定，并清除胎盘内残留的血液。实验历程中，PH维持在（7.4±0.05），通过PH计进行连续监测，并利用CO2进行微调。两侧循环的灌注压均通过压力传感器进行连续测量，每隔1min对压力值和PH值进行一次记录。为了监测胎盘的完整性和活性，灌注结束后测定胎盘小叶的葡萄糖消耗量和乳酸生成量。建立单胎盘小叶的双向灌注模型。灌注模型随机分为密闭式模型组和开放式模型组（n=10）。密闭式模型：母体→胎儿组（MTF组， n=3）和胎儿→母体组（FTM组，n=3）：胎盘小叶经30min灌注平衡期后，母体或胎儿侧循环加入10ng/ml，安替比林1μg/ml。于加药后15、30、60、90、120min，以母体和胎儿侧储液瓶中抽取灌注液样本1ml，测定、安替比林、葡萄糖和乳酸浓度，计算的绝对转运率和相对转运率。母体侧循环用新鲜冰冻血浆进行灌注，总容量设定为250ml；胎儿侧循环用含白蛋白4g/100ml的KRB缓冲液进行灌注，总容量设定为100ml。开放式模型：母体→胎儿组（MTF组，n=4）：采取KRB缓冲液进行灌注，母体侧储液瓶容量设定3000ml，胎儿侧储液瓶容量设定为1000ml。灌注液流经胎盘后分别流入两个废弃的储液瓶，不再循环利用。逐渐增加母体侧浓度：1、10、20、50、100ng/ml，连续灌注2h，每隔15min分别抽取母体储液瓶和胎儿侧静脉流出口的灌注液样本2ml。测定母体侧储液槽的浓度、胎儿侧静脉流出口灌注液流速和的浓度，计算的转运速率。建立高效液相色谱串联质普技术测定药物浓度策略，采取枸橼酸注射液做内标，以甲醇和0.1%甲酸水为流动相，色谱柱为Phenomenex SB-C18柱（2.1×30mm，1.8um），流速0.2ml/min。四级杆质谱采取正离子方式，离子采集方式为多反应监测方式（MRM），离子源温度为100°C，雾化气压力为25.0psi，雾化气流速为8L/min。采集离子（双子离子方式）：（317.1，228.2），（105.1，188.2），安替比林为（56.1，76.9）。用此策略测定浓度和安替比林浓度。结果：密闭式模型:国产可以快速通过胎盘，无论是母体至胎儿（M→F）或胎儿至母体（F→M）方向。的相对转运率（的绝对转移率/安替比林的绝对转移率）（M→F：0.66±0.04），（F→M：0.76±0.03），二者无显著性差别（P＞0.05）。开放式模型：随着母体侧药物浓度的逐渐增加（1，10，20，50，100ng/ml），的绝对转运率逐渐增高。结论：在离体人胎盘单绒毛小叶双向灌注模型中，国产的相对转运率随时间的延长无显著变化，其转运速率随母体侧药物浓度的增加而逐渐增加。胎盘组织对有一定的蓄积作用，但蓄积量较少，可能与本身的辛醇/水分配系数较低有联系。本探讨建立的HPLV/MS/MS技术测定药物浓度的策略灵敏度高，选择性强，能够满足体内生物样品浅析的需要。关键词：哌啶类论文胎盘论文胎盘功能试验论文液-质联用论文
目录3-4
摘要4-6
ABSTRACT6-9
前言9
材料与策略9-15
结果15-16
附图16-21
附表21-23
讨论23-25
结论25