试谈蛇床子蛇床子素抗焦虑作用科技

[摘要] 目的 运用行为药理学手段观察蛇床子素（osthol，Ost）对小鼠的抗焦虑作用。 方法 采用高架十字迷路实验、明暗穿箱实验、新型食物消耗实验和包埋实验观察蛇床子素对焦虑模型小鼠的影响。 结果 蛇床子素3.50 mg/kg组能明显增加小鼠在高架十字迷路开臂的次数与时间，与溶媒对照组比较，差异有统计学意义（P < 0.05）；蛇床子素7.00 mg/kg可使小鼠在明箱停留时间和穿箱次数增加，增强小鼠对明箱的探究兴趣；蛇床子素（3.50、7.00、14.00 mg/kg）可显著增加小鼠5 min内的新型食物消耗量；蛇床子素（14.00、28.00 mg/kg）能明显减少被小鼠包埋的玻璃球个数，抑制小鼠的包埋活动。4个实验中，蛇床子素都表现出显著的抗焦虑效果。 结论 蛇床子素对焦虑模型小鼠具有良好的抗焦虑作用。
[关键词] 蛇床子素；抗焦虑；高架十字迷路；明暗穿箱
[] A[文章编号] 1673-7210（2012）10（b）-0019-03
蛇床子素（osthol，Ost），别名欧芹酚甲醚，为伞形科一年生草本植物蛇床Cnidium monnieric（L.）Cuss.成熟的果实蛇床子中提取的含量最高的一种香豆素。蛇床子素的化学名称为7-甲氧基-8-异戊烯基香豆素，分子式为C15H16O3，分子量为244.29。蛇床子素具有解痉、降血压、抗心律失常、增强免疫功能及抗广谱菌作用且能够温肾壮阳，燥湿，祛风，杀虫。目前很多中草药的抗焦虑实验研究表明，能产生抗焦虑作用的中药多为作用于中枢神经系统并产生镇静作用的药物。通过查阅文献发现，蛇床子素对中枢神经系统功能可产生较为广泛的影响，连其深等[3]报道蛇床子素可通过抑制大脑皮层而发挥镇静作用，同时有研究表明蛇床子素可显著改善小

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鼠学习记忆功能[4]。目前尚未见有关蛇床子素抗焦虑作用的文献报道，因此本研究通过采用小鼠高架十字迷路实验、明暗穿箱实验、新型食物消耗实验和包埋实验，观察蛇床子素对焦虑模型小鼠产生的影响，为蛇床子素中枢神经系统功能的进一步研究及开发提供实验依据。

1 仪器与试药

1.1 实验动物

昆明种小鼠，雄性，体重22～26 g。购于哈尔滨医科大学实验动物中心，动物质量许可证号：SCXK（黑）2006-010。因本实验为行为药理学实验，故实验前将小鼠饲养于反向明暗循环的环境中1周以适应陌生环境。反向明暗循环：早7∶00～晚7∶00无光线，晚7∶00～早7∶00开灯。

1.2 药品与试剂

蛇床子素，南京泽朗医药科技有限公司，批号：100429。实验前吐温-80助溶，蒸馏水稀释至所需浓度，每个实验前蛇床子素都连续给药6 d。地西泮片（diazepam，DZ）：阳性对照药，黑龙江肇东华富药业有限责任公司，批号：100216，配制时用吐温-80助溶，蒸馏水稀释至所需浓度。

2 方法和结果

2.1 小鼠高架十字迷路实验[5]

小鼠66只，随机分为6组，分别为：（A）溶媒对照组；（B）地西泮2.00 mg/kg组；（C）蛇床子素1.75 mg/kg组；（D）蛇床子素3.50 mg/kg组；（E）蛇床子素7.00 mg/kg组；（F）蛇床子素14.00 mg/kg组。各组小鼠灌胃给药后60 min开始高架十字迷路实验。实验室内安装开启红灯，勿用白炽灯。实验开始后用手托着小鼠将其放到高架中间区，小鼠头面向开臂，用摄像装置记录实验小鼠的活动情况，每只小鼠记录5 min。为避免小鼠气味及粪便对其他小鼠产生影响，故每只小鼠实验完都要对实验装置进行清洗并用干毛巾擦干。实验结束后，通过录像查看并统计实验参数，包括实验5 min内小鼠进入开臂与闭臂次数，进入开臂与闭臂的时间。结果见表

1、图1。

结果表明，蛇床子素3.50 mg/kg组小鼠进入开臂次数为9.9次，进入迷路开臂的次数百分率为32%，在开臂的停留时间为63.9 s，停留时间的百分率为43%，与溶媒对照组比较，两者具有明显差异（P < 0.05）。同时，蛇床子素

7.00 mg/kg组小鼠在迷路开臂的停留时间明显的延长（P < 0.05）。

2.2 小鼠明暗穿箱实验[6]

小鼠66只，随机分为6组，分别为：（A）溶媒对照组；（B）地西泮2.00 mg/kg组；（C）蛇床子素1.75 mg/kg组；（D）蛇床子素3.50 mg/kg组；（E）蛇床子素7.00 mg/kg组；（F）蛇床子素14.00 mg/kg组。各组小鼠灌胃给药后60 min开始明暗穿箱实验。实验进行时箱内安装100 W白炽灯照明，光强度用测光仪测试需达到400 Lux，暗箱内无光照。实验开始后把实验小鼠放置到暗箱内，小鼠头背向暗箱出口，用摄像装置记录实验小鼠的活动情况，每只小鼠记录5 min。为避免小鼠气味及粪便对其他小鼠产生影响，故每只小鼠实验完都要对实验装置进行清洗并用干毛巾擦干。实验结束后，通过录像查看并统计实验参数：小鼠进入明箱的潜伏期、5 min内小鼠在明箱中的滞留时间、在明箱与暗箱间的穿梭次数及跨格数。结果见表2。
由表2可见，蛇床子素7.00 mg/kg组小鼠在明箱中的滞留时间为182.5 s，在明箱与暗箱间的穿梭次数为5.9次，与溶媒对照组比较均明显增加（P < 0.05）。同时给予蛇床子素组的小鼠总的跨格数与其他组比较无差异，可见蛇床子素在发挥抗焦虑作用的同时不抑制小鼠的活动与行为。

2.3 小鼠新型食物消耗实验[7]

分组同上。各组分别为：（A）溶媒对照组；（B）地西泮0.50 mg/kg组；（C）蛇床子素1.75 mg/kg组；（D）蛇床子素3.50 mg/kg组；（E）蛇床子素7.00 mg/kg组；（F）蛇床子素14.00 mg/kg组。于实验前1天16∶00禁食，禁食16 h。各组小鼠灌胃给药后60 min开始食物消耗实验。实验开始后把实验小鼠单独放置到干净的鼠盒中，鼠盒中配有食物皿，皿中放置称量好的新型食物（食物配比要求为鼠料粉∶豆油 = 2∶1），实验进行5 min。实验结束后实验人员通过称量剩余食物的重量来计算小鼠的食物消耗量。见图2。由图2可见，禁食16 h后，通过灌胃给药， 与溶媒对照组比较蛇床子素（3.50、7.00、14.00 mg/kg）均可使小鼠 5 min内的食物消耗量显著增加（P < 0.01或P < 0.05）。

2.4 小鼠包埋实验[8]

分组同上。各组分别为：（A）溶媒对照组；（B）地西泮5.00 mg/kg 组；（C）蛇床子素3.50 mg/kg组；（D）蛇床子素7.00 mg/kg组；（E）蛇床子素14.00 mg/kg组；（F）蛇床子素28.00 mg/kg组。实验于给药后1 h进行。实验于19∶00～22∶00的安静环境下进行。实验时将小鼠置于塑料盒内（24 cm×14 cm×14 cm），盒内放置厚度为5 cm的垫料，24颗玻璃球均匀分布于垫料表面。30 min后将小鼠取出，观察记录被垫料包埋的玻璃球个数，观察时以玻璃球被覆盖总体积的2/3以上（包括2/3）为准。见图3。

3 讨论

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焦虑症的基本特征为泛化且持续的焦虑，除遗传因素与神经生物学因素外，还有很重要的一个原因：心理因素。行为主义理论认为，焦虑是对某些环境刺激的恐惧而形成的一种条件反射。心理动力学理论认为，焦虑源于内在的心理冲突，是被压抑在潜意识中的冲突被激活，从而形成焦虑[10]。
本实验采用国际通用的经典的抗焦虑实验模型，从行为药理学角度考察了一定剂量范围内蛇床子素的抗焦虑作用。实验结果显示蛇床子素可增加高架十字迷路、明暗穿箱实验中小鼠的探究行为，促进小鼠在新型食物消耗实验中的食欲，并且在包埋实验中的抑制小鼠包埋行为，这说明蛇床子素可显著地压制小鼠应激后的焦虑行为，表现明显的抗焦虑作用。越来越多的证据表明生物化学因素是造成焦虑症最为重要的原因之一。神经递质及相关受体分布于脑内各个不同的部位，对焦虑的各个方面，包括注意、唤醒、恐惧反应、镇静等，通过直接或间接的机制产生不同的调节作用，通过这些调节作用的整合而表现出焦虑的不同类型与程度[11]。文献报道蛇床子素对小鼠脑内的中枢神经递质如胆碱酯酶活性有非常显著的抑制作用[4]，这为蛇床子素改善焦虑提供了神经生化基础，也可能是此药产生抗焦虑作用的机制之一。
本实验通过四个比较理想的抗焦虑动物模型对蛇床子素的抗焦虑作用进行研究，发现蛇床子素可显著改善焦虑动物的行为异常。本实验结果为蛇床子素抗焦虑作用的研究和应用提供了依据，对于进一步深入研究蛇床子素的中枢神经系统作用具有重要的意义。
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（收稿日期：2012-05-14本文编辑：卫 轲）