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探究皮层多系统萎缩动物模型建立与光感基因对模型小鼠大脑M1区干预信

收藏本文 2024-02-12 点赞:29114 浏览:124967 作者:网友投稿原创标记本站原创

摘要:本课题探讨采取3-NP和MPTP两种神经毒素通过腹腔注射建立P型多系统萎缩小鼠模型,并通过半定量行为学、滚筒测试、爬杆测试确定建立的模型小鼠具备P型多系统萎缩的运动障碍,并利用GFAP、TH两种抗体通过免疫荧光组化染色证实模型小鼠成功复制了P型多系统萎缩的病理特点即黑质-纹状体变性,以而证明了系统毒素给药可以成功的建立了P型多系统萎缩小鼠模型,模型成功的建立为发病机制的探讨、评估治疗手段提供了探讨平台。在成功建立P型多系统萎缩模型的基础上,由腺病毒作为载体,CaMKIIa作为启动子,将荧光蛋白ChR2和NpHR以PA5-CaMKIIa::ChR2(H134R)-mCherry、PA5-CaMKIIa::NpHR(H134R)-mCherry的形式导入模型小鼠的M1区,并利用免疫荧光组化染色确定荧光蛋白在M1区表达,然后利用光感基因调控技术分别光照植入的荧光蛋白ChR2和NpHR,以而分别兴奋和抑制动物模型的M1区并同时对模型小鼠进行滚筒测试,记录模型小鼠光照前后的行为学变化,以进一步明确M1区为治疗多系统萎缩的有效靶点,光感基因神经调控技术为有效的治疗手段。关键词:多系统萎缩论文光感基因调控技术论文初级运动皮层论文动物模型论文

    提要4-5

    前言5-7

    中文摘要7-9

    Abstract9-17

    第1章 引言17-21

    第2章 文献综述21-50

    2.1 多系统萎缩22-31

    2.1.1 MSA 的定义22

    2.1.2 MSA 的流行病学22

    2.1.3 MSA 的病理学转变22-24

    2.1.4 MSA 的临床分型24

    2.1.5 MSA 的临床特点及治疗24-25

    2.1.6 诊断标准25-27

    2.1.7 多系统萎缩临床评估量表27-28

    2.1.8 多系统萎缩的辅助检查28-30

    2.1.9 MSA 的治疗措施及预后30-31

    2.2 光感基因神经调控技术31-41

    2.2.1 光感基因调控技术的原理及探讨近况31-38

    2.2.2 光感基因调控技术成为未来有效治疗手段的优势38-41

    2.3 MSA 动物模型概述41-50

    2.3.1 建立多系统萎缩动物模型的作用41-42

    2.3.2 立体定位模型42-44

    2.3.3 系统毒物模型44-45

    2.3.4 转基因模型45-47

    2.3.5 DUAL-HIT 模型47-48

    2.3.6 各个模型的优缺点48-49

    2.3.7 各个模型所具备的病理转变49-50

    第3章 建立 P 型多系统萎缩动物模型50-84

    3.1 实验材料与策略51-63

    3.1.1 实验动物及分组51-52

    3.1.2 建立动物模型的试剂制备52

    3.1.3 动物模型的制备52-53

    3.1.4 动物模型的成功标准53-54

    3.1.5 动物模型的行为学测定54-57

    3.1.6 免疫荧光组化染色57-62

    3.1.7 统计学浅析62-63

    3.2 实验结果63-76

    3.2.1 半定量行为学结果63-65

    3.2.2 滚筒测试行为学结果65-66

    3.2.3 爬杆测试行为学结果66-68

    3.2.4 免疫荧光组化染色结果68-74

    3.2.5 统计学浅析结果74-76

    3.3 讨论76-83

    3.3.1 P 型多系统萎缩小鼠模型建立的探讨78-81

    3.3.2 MSA-P 小鼠模型的行为学评价手段的探讨81-83

    3.4 结论83-84

    第4章 利用光感基因调控技术干预模型小鼠的 M1 区84-106

    4.1 实验材料及策略85-97

    4.1.1 实验动物及分组85-86

    4.1.2 A 包装案例86-88

    4.1.3 A 纯化案例88-89

    4.1.4 将以病毒为载体的光感蛋白注入小鼠 M1 区并造模89-91

    4.1.5 对导入病毒的小鼠行免疫荧光组化染色证实是否表达91-95

    4.1.6 光感基因调控技术干预模型小鼠的 M1 区95-96

    4.1.7 统计学浅析96-97

    4.2 实验结果97-101

    4.2.1 光感蛋白病毒在小鼠大脑 M1 区表达97-99

    4.2.2 利用光感基因技术干预模型小鼠 M1 区前后滚筒测试行为学结果99-100

    4.2.3 统计学浅析结果100-101

    4.3 讨论101-105

    4.4 结论105-106

    第5章 本课题优缺点106-108

    5.1 课题革新点106

    5.2 课题缺点106-107

    5.3 进一步探讨计划107-108

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