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试谈油松油松花粉多糖分离纯化与抗氧化活性查抄袭率怎么

收藏本文 2024-02-07 点赞:6848 浏览:18390 作者:网友投稿原创标记本站原创

摘要:油松花粉多糖具有抗肿瘤、增强免疫等功能。课题以华北承德地区的油松花粉为原料,对其中的花粉活性多糖的提取工艺进行探讨;苯酚-硫酸法测定花粉多糖含量的显色条件进行优化;采取DEAE-纤维素52柱层析、Sephacryl S-200凝胶柱层析对花粉多糖进行分离和纯化;运用Sephacryl S-300凝胶柱层析进行纯度鉴定;运用红外光谱浅析、紫外扫描浅析对花粉多糖的结构进行初步探讨;通过体外清除超氧阴离子自由基和羟基自由基探讨油松花粉多糖的抗氧化活性。主要的探讨结果如下:(1)以葡萄糖为对照,优选苯酚-硫酸法测定油松花粉多糖含量的显色条件。最佳显色条件为:取待测油松花粉多糖2mL,加入浓度为5%苯酚1mL,迅速滴加浓硫酸6.0mL,摇匀后于沸水浴中放置10min,在483nm处测定吸光度值。(2)对油松花粉的水提工艺进行了探讨,探讨提取温度、提取时间、料液比和提取次数对多糖提取率的影响。在单因素实验的基础上,通过正交试验确定最佳提取工艺条件。结果表明浸提温度对多糖提取率的影响最大,其次为料液比、提取次数,浸提时间的影响最小。油松花粉多糖的最佳提取工艺条件为:提取温度为70℃,料液比为1:12,提取时间为2h,提取次数为3次。在此提取条件下,松花粉多糖的得率为1.81%。(3)用DEAE-纤维素52对油松花粉精制多糖进行初步分离,主要得到D1和D3两个组分。再用Sephaeryl S-200凝胶柱色谱分别对多糖D1和D3进一步分离纯化得到两种均一组分D11和D31。经过Sephaeryl S-300凝胶柱色谱进行纯度鉴定,表明D11和D31是均一多糖。采取用凝胶过滤法测定D11分子量为76468。UV检测显示油松花粉多糖D11于280nm处未见有核酸和蛋白特点吸收峰,经IR检测证实多糖D11具有多糖类物质的特点吸收峰。(4)油松花粉多糖粗多糖、精制多糖对O2-·自由基和·OH自由基均有一定的清除作用,并且随着多糖浓度的增大清除效果增强。油松花粉精制多糖的作用效果大于油松花粉粗多糖。关键词:油松花粉论文多糖论文苯酚-硫酸法论文分离纯化论文抗氧化活性论文

    摘要4-5

    ABSTRACT5-10

    1 前言10-27

    1.1 油松花粉概况10-14

    1.1.1 油松花粉的营养成分11

    1.1.2 油松花粉的药理功能11-14

    1.2 多糖的活性14-16

    1.2.1 抗氧化作用14

    1.2.2 调节免疫功能14-15

    1.2.3 抗溃疡作用15-16

    1.2.4 降血脂作用16

    1.2.5 抗辐射作用16

    1.2.6 抗凝血及血栓作用16

    1.3 多糖的提取及分离纯化16-20

    1.3.1 多糖的提取16-17

    1.3.2 多糖的分离纯化17-20

    1.4 多糖的性质和结构20-22

    1.4.1 多糖的性质20

    1.4.2 多糖的结构20

    1.4.3 多糖的结构测定20-22

    1.5 花粉多糖的探讨进展22-25

    1.6 本论文的探讨作用、主要内容和革新点25-27

    1.6.1 本论文的探讨作用25

    1.6.2 本论文主要探讨内容25-27

    2 苯酚-硫酸法测定油松花粉多糖含量探讨27-35

    2.1 实验材料27

    2.1.1 实验仪器27

    2.1.2 试剂与药品27

    2.2 实验原理27-28

    2.3 实验策略28-29

    2.3.1 油松花粉精制多糖的制备28

    2.3.2 供试液的配制28

    2.3.3 显色条件的选择28-29

    2.3.4 标准曲线的制作与策略学考察29

    2.4 实验结果与讨论29-34

    2.4.1 显色条件实验结果29-32

    2.4.2 策略学考察结果32-34

    2.5 本章小结34-35

    3 油松花粉多糖提取条件探讨35-42

    3.1 实验材料35

    3.1.1 实验仪器35

    3.1.2 试剂和药品35

    3.2 油松花粉多糖提取策略确定35-36

    3.3 实验策略36-37

    3.3.1 油松花粉粗多糖的制备36

    3.3.2 油松花粉多糖提取的单因素试验36

    3.3.3 油松花粉多糖提取的正交试验设计36

    3.3.4 油松花粉多糖提取率计算策略36-37

    3.4 实验结果与讨论37-41

    3.4.1 单因素实验结果37-39

    3.4.2 油松花粉粗多糖提取的正交试验结果39-41

    3.5 本章小结41-42

    4 油松花粉多糖的分离纯化与结构探讨42-53

    4.1 引言42

    4.2 实验材料42-43

    4.2.1 实验仪器42-43

    4.2.2 试剂和药品43

    4.3 实验策略43-46

    4.3.1 油松花粉精制多糖的制备43

    4.3.2 油松花粉多糖的柱层析43-45

    4.3.3 油松花粉多糖纯度鉴定45-46

    4.3.4 油松花粉多糖分子量测定46

    4.3.5 油松花粉多糖结构浅析46

    4.4 实验结果与讨论46-52

    4.4.1 油松花粉多糖的柱层析46-48

    4.4.2 多糖D_(11)与D_(31)纯度鉴定48-49

    4.4.3 均一组分D_(11)分子量测定49-50

    4.4.4 油松花粉多糖UV扫描结果50-51

    4.4.5 油松花粉多糖IR浅析结果51-52

    4.5 本章小结52-53

    5 油松花粉多糖的抗氧化活性和保湿性53-58

    5.1 引言53

    5.2 实验材料53-54

    5.2.1 实验仪器53

    5.2.2 试剂与药品53-54

    5.3 实验策略54-55

    5.3.1 油松花粉多糖对超氧阴离子自由基(O2~-·)的清除实验54

    5.3.2 油松花粉多糖对羟基自由基(·OH)的清除实验54-55

    5.3.3 油松花粉多糖保湿性能评价55

    5.4 实验结果与讨论55-57

    5.4.1 油松花粉多糖对超氧阴离子自由基(O2~-·)的清除实验结果55-56

    5.4.2 油松花粉多糖对羟基自由基(·OH)的清除实验结果56

    5.4.3 油松花粉多糖保湿性实验结果56-57

    5.5 本章小结57-58

    6 结论58-59

    7 展望59-60

    8 参考文献60-66

    9 攻读硕士学位期间发表论文情况66-67

    10 致谢67

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