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摘要：目的:设计羧壳聚糖钙浸提液对SD大鼠颅骨成骨细胞的细胞毒性试验,对羧壳聚糖钙这一新型含钙化合物初步的生物学评价,为其研究应用打下基础。方法:实验1、将一定浓度的羧壳聚糖溶液与饱和的氯化钙溶液混合,在一定温度、酸碱度、一定的反应时间下发生反应,一种新的物质,并检测该物质结构表征物质鉴定。实验2、酶解--组织块大鼠颅骨成骨细胞的原代培养及传代培养,培养中对细胞形态学观察及碱性磷酸酶组织化学染色和矿化结节茜素红染色实验细胞鉴定。实验3、参照国标,制作羧壳聚糖钙化合物的浸提液,并MTT试验检测浸提液对原代培养SD大鼠成骨细胞的毒性作用,对新型化合物初步的生物学评价。结果:1、化学反应生成的新物质呈白色粉末状。将羧壳聚糖及新物质均红外光谱表征分析,对二者波峰比较证实:新物质为羧壳聚糖与钙离子发生络合反应后的产物——羧壳聚糖钙。2、倒置显微镜下观察所得细胞形态不一:长梭形、多边形、三角形等,细胞可有数目不等的细胞突起。对细胞碱性磷酸酶组织化学染色,结果阳性:细胞呈灰黑色染色。汇合后的细胞可重叠生长,并出现矿化结节,对其茜素红染色,结果阳性:矿化结节红染。形态学观察及组织化学染色证明成骨细胞培养成功。3、细胞毒性实验中对实验组与对照组的细胞形态观察,MTT试验细胞数目检测和细胞功能评价,倒置显微镜下形态学观察发现实验组细胞生长形态良好与对照组无差异,实验组成骨细胞第1,2,3,5,7天的相对增殖率均在97%以上,毒性分级为0或,提示羧壳聚糖钙无细胞毒性。:1、羧壳聚糖钙是一种新型含钙化合物。2、酶解--组织块法SD大鼠颅骨成骨细胞原代培养并传代培养,一定数量并且品系较纯的成骨细胞,可以本实验的细胞数量和质量要求。3、羧壳聚糖钙化合物的细胞毒性试验证明羧壳聚糖钙这一新型含钙化合物无细胞毒性,有望研究应用。关键词：羧壳聚糖钙论文成骨细胞论文细胞毒性论文
中文摘要5-7
Abstract7-9
引言9-12