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邻苯酚对HepG2细胞遗传毒性与氧化应激、溶酶体膜完整性机制

收藏本文 2024-01-20 点赞:13452 浏览:50576 作者:网友投稿原创标记本站原创

摘要:目的:邻苯酚(Ortho-phenylphenol, OPP),是防腐保鲜剂的主要成分,被广泛应用于水果蔬菜的防霉保鲜,但其具有内吸性,可透过果皮果肉,造成残留,对人的肝、肾及神经系统都有一定的毒性。多项研究结果,OPP具有的致癌性和致突变性。Mariko MurataOPP对细胞的DNA损伤与活性氧的产生有关。本研究观察OPP致HepG2细胞DNA损伤,探讨OPP对DNA损伤可能的毒性机制(氧化性损伤和溶酶体等细胞器损伤),为评估OPP对人类的健康危害实验及理论依据。方法:OPP引起体外HepG2细胞DNA损伤:单细胞凝胶电泳试验检测细胞DNA损伤,评价OPP的遗传毒性。(1)以2’,7’-二氢二氯荧光素(DCFH)和苯二醛(OPT)分别测定细胞内活性氧(ROS)以及还原性谷胱甘肽(GSH)。(2)以吖啶橙(AO)和罗丹明(Rhodamine 123)分别测定细胞内溶酶体膜稳定性和线粒体膜电位的改变。(3)羟基酪醇(HT)、氯化铵(NH4Cl)、抑胃肽(pepstain A,组织蛋白酶D的抑制剂)和地昔帕明(desipramine,酸性神经磷脂酶的抑制剂)四种干预剂观察氧化性损伤和溶酶体膜稳定性对DNA损伤的影响。实验结果用SPSS v11.5统计软件统计分析。结果:OPP(200μM-800μM)作用于HepG2细胞60min后,引起DNA链断裂,细胞成彗星样拖尾,其尾长增长,且呈剂量依赖性;同时,细胞内ROS增加、GSH下降以及线粒体膜电位下降。OPP(200μM-800μM)作用于HepG2细胞40min后,可引起细胞内溶酶体膜稳定性改变。用HT、NH4Cl、抑胃肽和地昔帕明四种干预剂处理后,OPP引起的DNA链断裂、细胞内ROS和GSH、线粒体膜电位以及溶酶体膜稳定性的改变都有地减弱,上述四种干预剂的保护作用十分。:OPP引起细胞DNA损伤,对HepG2细胞具有遗传毒性。HT在减弱OPP引起的DNA链断裂的同时,降低了细胞内ROS和GSH消耗量,OPP引起的HepG2细胞DNA损伤与氧化应激有关;HT和NH4Cl对OPP引起的溶酶体膜稳定性和线粒体膜电位改变的抑制作用及抑胃肽和地昔帕明对OPP引起的DNA链断裂的保护作用也OPP引起的HepG2细胞DNA损伤的可能机制与溶酶体、线粒体有关。关键词:邻苯酚论文DNA损伤论文氧化应激论文溶酶体膜稳定性论文线粒体膜电位论文

    摘要4-6

    Abstract6-8

    前言8-9

    和方法9-12

    结果12-19

    讨论19-22

    22-23

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