本站原创
摘要：目的：探讨祛风通窍方对血管性痴呆(VD)大鼠海马线粒体(MIT)超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、细胞色素氧化酶(COX)、细胞色素C氧化酶Ⅱ亚型(COX II)的基因表达及细胞超微结构影响,初步探讨祛风通窍方对VD大鼠MIT氧化损伤的保护机制。策略：1.分组策略：造模前后分别用Morris水迷宫筛选符合要求的雄性SD大鼠60只,采取永久性结扎双侧颈总动脉(2-VO)法造模,随机分为检测手术组、模型组、尼莫地平组(简称“阳性组”)、祛风通窍方高剂量组(简称“高剂量组”)、祛风通窍方中剂量组(简称“中剂量组”)、祛风通窍方低剂量组(简称“低剂量组”)各10只。2.给药策略：阳性组予尼莫地平6.25mg/kg/d灌胃,高、中、低剂量组分别给予祛风通窍方26.8g/kg/d、13.4g/kg/d、6.7g/kg/d灌胃,检测手术组、模型组予等体积(3m1)蒸馏水灌胃,连续30天。3.取材：Morris水迷宫检测大鼠行为学,每组随机抽2只心脏灌注内固定,取脑组织；余下大鼠处死后取海马,制成海马组织匀浆,差速离心法提取MIT,-80℃保存。4.指标检测：化学比色法检测SOD活性、MDA含量；ELISA法检测COX活性；RT-PCR法检测COXⅡ的mRNA表达；光镜观察海马CA1区锥体细胞及电镜观察额叶皮层神经元线粒体形态变化。结果：1.行为学情况：与检测手术组比较,模型组、阳性组及高、中、低剂量组逃避潜伏期(EL)延长,原平台象限停留时间缩短,跨越虚拟平台次数减少,差别有统计学作用(P0.05)；与模型组比较,阳性组,高、中剂量组大鼠EL随着训练时间延长而缩短,原平台象限的停留时间延长,跨越虚拟平台的次数增加,差别有统计学作用(P0.05),低剂量组EL虽有减少,但无统计学作用(P0.05)；与阳性组比较,高、中剂量组大鼠EL缩短,原平台象限停留时间及跨越虚拟平台次数增加,差别有统计学作用(P0.05)；与低剂量组比较,高、中剂量组大鼠EL缩短,原平台象限停留时间及跨越虚拟平台次数增加,差别有统计学作用(P0.05)。2.SOD、MDA、COX检测：与检测手术组比较,模型组、阳性组及高、中、低剂量组SOD活性降低,MDA含量升高,COX活性降低,差别有统计学作用(P0.05)；与模型组比较,阳性组及高、中剂量组SOD活性升高,MDA含量降低,COX活性升高,差别有统计学作用(P0.05)；与阳性组比较,高、中剂量组SOD活性增强,MDA含量降低,COX活性增强,差别有统计学作用(P0.05)；与低剂量组比较,高、中剂量组SOD活性升高、MDA含量降低,COX活性升高,差别有统计学作用(P0.05)。3.光镜观察海马CA1区锥体细胞结果：检测手术组锥体细胞3-4层,排列整齐紧密；细胞完整,形态正常,界限清晰,胞核大而圆,胞质丰富。模型组锥体细胞丢失显著,细胞1-2层,排列散乱；界限不清,大量细胞变形；核固缩碎裂、呈深蓝色、胞浆浓缩。阳性组及高、中剂量组锥体细胞层次、排列、形态得到了显著改善。4.电镜结果：检测手术组MIT结构正常,嵴结构清晰。模型组MIT显著水肿破裂,MIT嵴结构不清晰,MIT部分固缩。阳性组,高、中剂量组MIT受损情况得到了显著改善。低剂量组MIT转变介于阳性组与模型组之间。5.COXⅡ的mRNA表达：各组目的基因条带均出现,与检测手术组比较模型组基因条带亮度变暗,各给药组基因条带亮度相对变亮。相对灰度值：与检测手术组比较,模型组及各治疗组相对灰度值降低,差别有统计学作用(P0.05)；与模型组比较,阳性组及高、中剂量组灰度值显著增加,差别有统计学作用(P0.05)；与阳性组比较,高、中剂量组灰度值增加,差别有统计学作用(P0.05)；与低剂量组比较,高、中剂量组灰度值增高,差别有统计学作用(P0.05)。结论：1.祛风通窍方可改善VD大鼠学习记忆功能,改善VD大鼠海马CA1区锥体细胞及额叶皮层神经元MIT的形态。2.祛风通窍方对VD大鼠线粒体氧化损伤的保护作用呈现一定的量效联系。3.可能的机制：通过增强SOD活性、减少MDA生成,发挥抗氧化作用,保护MIT功能,增加COX Ⅱ的表达,提升COX活性,改善VD大鼠的认知功能。关键词：祛风通窍论文血管性痴呆论文线粒体论文氧自由基论文保护机制论文
摘要3-6
Abstract6-11
前言11-15
材料与策略15-27
结果27-38
讨论38-51
结论51-52