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摘要：氯吡格雷是临床常用的抗血小板药物,广泛运用于急性冠脉综合征和经皮冠状动脉介入治疗的抗血小板治疗,氯吡格雷与阿司匹林联用是国际上支架植入术后的标准抗栓治疗案例。然而氯吡格雷的抗血小板作用有着个体差别,部分病人在运用常规剂量的氯吡格雷后仍然发生血栓事件,这种现象定义为氯吡格雷抵抗(clopidogrel resistance,CR)。目前氯吡格雷抵抗的机制尚不十分清楚,环境因素和遗传因素在氯吡格雷抵抗发生历程中起重要作用基因多态性被认为是其中一个重要的机制。氯吡格雷在体内的代谢历程与细胞色素P450 2C19(CYP2C19)密切相关。本探讨拟采取聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)及焦磷酸测序的浅析策略,初步阐明CYP2C19基因单核苷酸多态性与CR之间的相关联系。探讨策略:本探讨共入选1102例住院冠心病患者,给予负荷剂量氯吡格雷600mg或300mg及阿司匹林300mg,服药后6小时(服用氯吡格雷600mg的病人)或24小时(服用氯吡格雷300mg的病人),用光学比浊法测定20 mol/L的ADP诱导的血小板聚集率,20 mol/L的ADP诱导的血小板聚集率≥70%,定义为CR;70%则定义为氯吡格雷非抵抗(Non-clopidogrel resistance,NCR)。所有患者均采取外周血白细胞提取基因组DNA,采取PCR-RFLP或焦磷酸测序的策略,检测所有入选探讨对象细胞色素P450 2C19基因标签单核苷酸多态性(Tag Single Nucleotide Polymorphi,TagSNP)的基因型和等位基因分布。结果:(1)入选患者CR的发生率为15.88%。(2)细胞色素P450 2C19 rs4244285位点(681GA)多态性在CR组和NCR组均有着GG、GA和AA三种基因型,在CR组和NCR组分别为28.6%、44.5%、26.9%和46.1%、45.3%、8.6%。细胞色素P450 2C19 rs4244285的A等位基因在CR组的基因型频率显著高于NCR组,与G等位基因携带患者相比,A等位基因携带患者发生CR的危险性显著增加(OR=2.123,95%CI:1.684~2.675,P0.001)。(3) CYP2C19基因rs7916649、rs3758581、rs11528090、rs4304697、rs3814637、rs10786172、rs4986893及rs12248560单核苷酸多态位点与氯吡格雷抵抗的发生无显著相关性(P 0.05)。结论:CYP2C19基因rs4244285位点(681GA)是CR独立的危险因素。关键词：细胞色素P450论文CYP2C19基因论文基因多态性论文氯吡格雷抵抗论文
缩略语表4-6
中文摘要6-8
ABSTRACT8-10
前言10-13
文献回顾13-26
1.氯吡格雷介绍13-14
2.氯吡格雷抵抗的定义及临床作用14-15
3.血小板聚集率的测定策略15-18
4.AR 和 CR 的机制18-26
1. 材料与策略26-30
1.1 探讨对象及材料26-30
2. 实验策略30-38
2.1 临床资料的采集及随访30
2.2 处理策略及测定指标30-33
2.3 连锁不平衡特点和标签SNP的选择33-34
2.4 CYP2C19 基因标签SNP基因型检测34-36
2.5 统计学浅析36-38
3. 实验结果38-54
3.1 基因组DNA电泳检测及标签SNP的基因定型结果38-44
3.2 探讨对象的基础临床特点44-46
3.3 Hardy–Weinberg平衡检验46-47
3.4 CYP2C19基因标签SNP的连锁不平衡结构浅析47-50
3.5 CYP2C19基因标签SNP的基因型及等位基因在CR组与NCR组间的分布50-54
4. 讨论54-58
小结58-59