内毒素天然钙网蛋白和重组钙网蛋白免疫生物学活性比较

中文摘要8-10

Abstract10-12

第一章 前言12-14

第二章 实验材料与策略14-28

2.1 实验材料15-16

2.1.1 试剂与培养基15

2.1.2 菌株与细胞株15

2.1.3 抗体15

2.1.4 ELISA 检测试剂盒15

2.1.5 实验动物及细胞15-16

2.1.6 仪器设备与耗材16

2.2 试验策略16-28

2.2.1 N-CRT 纯化策略16-18

2.2.2 rCRT 纯化策略18-19

2.2.3 rCRT 各个组分分离策略19-20

2.2.4 SDS-PAGE 及 Native-PAGE20

2.2.5 Western blot 实验历程20-21

2.2.6 考马斯亮蓝法测定蛋白浓度21-22

2.2.7 MTT 法检测细胞增殖22

2.2.8 小鼠腹腔巨噬细胞的制备22

2.2.9 蛋白刺激细胞实验22-23

2.2.10 N-CRT 与 LPS 之间共刺激实验23-24

2.2.11 ELISA 法检测细胞因子24-25

2.2.12 Polymyxin B 去除内毒素策略25

2.2.13 NO 检测25-26

2.2.14 动物免疫和血清效价检测26-27

2.2.15 数据浅析27-28

第三章 N-CRT和rCRT的纯化28-35

3.1 N-CRT 纯化条件摸索29-31

3.1.1 硫酸铵沉淀饱和度的摸索29-30

3.1.2 柱结合杂蛋白洗涤条件摸索30-31

3.2 N-CRT 纯化历程及结果31-32

3.3 rCRT 的纯化32-33

3.4 N-CRT 和 rCRT 生化特点鉴定33-34

3.5 本章小结34-35

第四章 N-CRT和rCRT免疫生物学活性探讨35-41

4.1 N-CRT 和 rCRT 刺激脾细胞增殖实验35-36

4.2 N-CRT 和 rCRT 刺激 PMC 实验36-37

4.3 LPS 对 N-CRT 功能的影响37-40

4.3.1 N-CRT 与 LPS 结合试验38

4.3.2 LPS 刺激 PMC 条件摸索38-39

4.3.3 N-CRT 和 LPS 共刺激实验39-40

4.4 本章小结40-41

第五章 rCRT 的分离及其各个组分生物学活性探讨41-46

5.1 rCRT各组分的分离41-42

5.2 rCRT各组分生化特点鉴定42-43

5.3 rCRT各组分生物学活性探讨43

5.4 RPL2蛋白性质探讨43-45

5.5 本章小结45-46

第六章 CRT 各种形式蛋白免疫原性和抗原性浅析46-51

6.1 N-CRT免疫新西兰大白兔46-47

6.2 N-CRT免疫C57BL/6小鼠47-48

6.3 rCRT及其各个组分免疫C57BL/6小鼠48-49

6.4 兔抗CRT多克隆抗体亲和力检测49

6.5 本章小结49-51

第七章 讨论51-55

7.1 N-CRT和rCRT的分离纯化51-52

7.2 CRT的生物学活性52-53

7.3 CRT的免疫原性53-54

7.4 总结54-55

文献综述55-62