液体深层发酵培养桦褐孔菌胞外多糖化学性质、结构与抗氧化活性集

摘要：桦褐孔菌（Inonotus obpquus）属于担子菌亚门，层菌纲，非褶菌目，多孔菌科，褐卧孔菌属，是一种珍稀的食药用真菌。主要分布于北半球北纬45°～50°的地区，是生长在寒带的木腐菌。桦褐孔菌含有多种活性成分，其开发运用价值非常广泛。桦褐孔菌多糖是桦褐孔菌中含有的一种重要的生物活性物质，它具有抗自由基氧化、免疫调节、抗衰老、降血糖、抗肿瘤等活性，然而桦褐孔菌天然资源稀缺，昂贵，直接以野生桦褐孔菌中提取活性物质成本很高且不利于自然资源的保护。本论文采取液体深层发酵培养桦褐孔菌的策略获取桦褐孔菌胞外多糖，探讨了用响应面法优化的基础培养基和在此基础上加入玉米秸秆作为木质纤维素来源的培养基发酵培养的桦褐孔菌胞外多糖（分别记作EPC和EPL），并比较了这两种胞外多糖的抗氧化活性和相关理化性质。实验结果表明：1、EPC和EPL除蛋白后的组分DEPC和DEPL，经DEAE-52柱层析后，以苯酚-硫酸法检测，作出洗脱曲线，均取前三个组分，记作DEPC1、DEPC2、DEPC3、DEPL1、DEPL2和DEPL3；2、DEPL的三个组分的糖含量和蛋白质含量的差别要比DEPC的三个组分的含量要显著，其中以DEPL1含糖量最高为89.7%，而蛋白含量最高的是DEPL3为38.3%；3、单糖组成浅析，DEPC以半乳糖含量最高，而DEPL的甘露糖含量最高，DEPC3和DEPL3的甘露糖含量分别达到49.8%和49.6%；4、各多糖组分羟基自由基清除活性大小，EPL＞EPC＞DEPL＞DEPC，DEPC3＞DEPC2＞DEPC1，DEPL3＞DEPL2＞DEPL1；5、各多糖组分DPPH自由基清除活性大小，EPL和DEPL活性相差不大，均强于EPC和DEPC，DEPC2＞DEPC3＞DEPC1，DEPL3＞DEPL2＞DEPL1；6、各多糖组分的IC50值，在羟基自由基和DPPH自由基的清除实验中，DEPC和DEPL的纯化组分，DEPL3具有最小的IC50值；7、Sephadex G-200纯化，6个经DEAE-52分离提纯的组分再经SephadexG-200纯化，根据其洗脱曲线发现6个多糖组分分子量分布比较单一；8、对经Sephadex G-200纯化后的多糖组分进行分子量测定发现胞外多糖组分的分子量并不是很高，重均分子量MW范围以29KDa到41KDa，且分子量分散度均不超过2。综上结果表明，加入木质纤维素的培养基发酵培养的桦褐孔菌胞外多糖要比基础培养发酵培养的胞外多糖的抗氧化活性要好，经过相关化学性质的探讨发现这两种多糖的化学性质也有较大的差别。抗氧化活性差别可能与多糖组分化学性质及结构特性的差别有关。关键词：桦褐孔菌论文液体深层发酵论文胞外多糖论文木质素论文纯化论文抗氧化活性论文

摘要8-10

Abstract10-12

第一章 绪论12-34

1.1 多糖的分类12-13

1.1.1 微生物多糖12

1.1.2 高等植物多糖12

1.1.3 动物多糖12-13

1.1.4 藻类多糖13

1.2 食药用真菌多糖13-16

1.2.1 食药用真菌多糖介绍13-14

1.2.2 真菌多糖的结构层次14

1.2.3 真菌多糖的结构浅析14-15

1.2.4 真菌多糖的活性与构效联系15-16

1.2.5 发酵培养真菌多糖16

1.3 真菌多糖的生物活性16-19

1.3.1 免疫调节活性17

1.3.2 抗肿瘤活性17-18

1.3.3 抗氧化及抗衰老活性18

1.3.4 降血脂、降血压、降血糖活性18-19

1.3.5 抗病毒与护肝活性19

1.3.6 其它活性及进展走势19

1.4 桦褐孔菌的探讨19-25

1.4.1 桦褐孔菌介绍19-20

1.4.2 桦褐孔菌的化学成分20-21

1.4.3 桦褐孔菌多糖介绍21

1.4.4 桦褐孔菌多糖活性探讨21-23

1.4.5 桦褐孔菌液体深层发酵探讨23

1.4.6 桦褐孔菌多糖提取策略探讨23-24

1.4.7 桦褐孔菌多糖的理化性质及初级结构探讨24-25

1.5 本论文探讨的目的和作用25

1.6 本论文探讨的主要内容25-27

液体深层发酵基本情况的摸索36-38

2.4 实验结果38-41

2.4.1 菌落、菌丝及孢子形态观察38

2.4.2 液态菌种的制备38-39

2.4.3 液体深层发酵基本情况的摸索39-41

2.5 小结41-43