摘要4-6
ABSTRACT6-11
前言11-12
第一章 :文献综述12-21
1 禽流感病毒的分子病原学探讨进展12-17
1.1 禽流感的流行概况和危害12
1.2 禽流感病毒的概况12-16
1.3 禽流感病毒的生物学特性16-17
1.4 水禽和候鸟在禽流感传播中的作用17
2 禽流感病毒的快速诊断策略探讨进展17-20
2.1 逆转录-聚合酶链式反应17-18
2.2 逆转录-巢式聚合酶链式反应18-19
2.3 逆转录-环介导等温核酸扩增技术19
2.4 实时荧光定量RT-PCR19-20
3 本课题的探讨作用20-21
第二章 :H6型禽流感病毒的分离鉴定和生物学特性探讨21-30
1 材料与策略21-26
1.1 材料21
1.2 策略21-26
2 结果26-28
2.1 病毒分离结果26
2.3 RT-PCR检测结果26
2.4 毒株NA亚型的测定结果26-27
2.5 H6型AIV病原性监测情况27-28
2.6 鸡胚半数感染量(EID_(50))的测定和鸡胚半数致死量(ELD_(50))的测定结果28
2.7 致病性实验结果28
3 讨论28-30
第三章 :7株H6亚型禽流感病毒的全基因序列测定与序列浅析30-54
1 材料和策略30-33
1.1 材料30
1.2 策略30-33
2 结果33-52
2.1 H6亚型AIV全基因RT-PCR扩增结果33
2.2 7株毒株的个基因片段克隆和序列测定结果33
2.3 7株H6亚型AIV全基因组序列浅析33-52
3 讨论52-54
第四章 :H6亚型禽流感病毒快速检测策略的建立54-68
1. H6亚型禽流感病毒RT-LAMP快速检测策略的建立54-62
1.1 材料与策略54-56
1.2结果56-60
1.3 讨论60-62
2. H6亚型禽流感病毒SYBR Green Ⅰ实时定量荧光PCR策略的建立62-68
2.1 材料与策略62-63
2.2 结果63-67
2.3 讨论67-68
第五章 :H6亚型禽流感病毒四种核酸检测策略比较68-74
1 材料与策略68-71
1.1 毒株和主要仪器试剂68
1.2 病毒RNA的提取68
1.3 质粒与核酸的梯度稀释68
1.4 核酸浓度测定68
1.5 引物的合成68-70
1.6 四种检测策略的最佳扩增条件70
1.7 四种核酸扩增策略的检出限测定70
1.8 临床样品的检测70-71
2 结果71-73
2.1 质粒标准品敏感性检测结果与病毒RNA敏感性检测结果71-72
2.2 临床样品检测结果72-73
3 讨论73-74
结论74-75