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试议基于植物内生菌代谢酶基因筛选抗癌传统中草药

收藏本文 2024-03-28 点赞:35134 浏览:159206 作者:网友投稿原创标记本站原创

摘要:目的以抗癌传统药用植物中筛选出含有特定代谢酶基因的植物内生菌并对其次级代谢产物的抗肿瘤活性进行初步探讨策略根据药用基础和相关记载鉴定采集34种传统的抗癌药用植物,并提取了这些植物的DNA;采取PCR技术特异性扩增内生菌的目标代谢酶基因,筛选含有这些基因的植物;对已筛选出的阳性植物再次采集,并进行其内生菌的分离和培养,并进一步纯化后,PCR特异性扩增16s rRNA、18s rRNA、PKS、NRPS基因,对内生菌rRNA序列浅析进行种属鉴定,同时筛选含有PKS、NRPS基因的内生菌;对筛选出的阳性菌的次级代谢产物抗肿瘤生物活性进行初步探讨。结果以7种阳性植物中分离出49株植物内生菌,其中内生细菌13株,占总数的26.5%,内生真菌36株,占总数的73.5%。通过对rRNA浅析,对49株内生菌进行了分子鉴定,内生真菌至少分属13个属,内生细菌至少分属7个属,内生真菌中青霉菌(Penicilpum),拟茎点霉菌(Phomopsis)是分离出的内生真菌中的优势属,分别占内生真菌的19.4%和25%。扩增内生菌的PKS基因,含有真菌PKS基因的菌株有23株,占内生真菌的63.9%;在13株植物内生细菌中,含有细菌PKS基因的菌株有9株,占植物内生细菌总数的69.2%;含有真菌和细菌NRPS基因的菌株各1株。对6株含有代谢酶基因的内生真菌菌株的次级代谢产物进行了初步的抗肿瘤活性探讨,有3株内生菌对细胞的生长有一定的抑制作用。结论药用植物尤其是有着于其中的内生菌,能产生具有生物活性的天然化合物。采取细菌和真菌PKS、NRPS代谢酶基因的筛选策略为发现植物内生菌来源天然药物提供了平台。关键词:药用植物论文植物内生菌论文次级代谢产物论文抗肿瘤活性论文

    縮略语一览表5-6

    中文摘要6-7

    ABSTRACT7-8

    引言8-11

    材料与策略11-32

    结果32-55

    讨论55-58

    结论58-60

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