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摘要：[目的]初步探讨云南白药对类风湿性关节炎大鼠CD4+CD25+调节性T细胞的干预作用及相关机制。[策略]选取6-8周龄S D雄性大鼠80只,60只于右足趾皮内注射0.1ml及尾根部多点注射0.2m1的胶原乳剂,并于第7天,21天于大鼠尾根部多点注射0.1ml胶原乳剂加强免疫制备CIA模型；致炎后第28天用HE染色法对关节组织作病理检查,结合大鼠关节肿胀度并进行关节炎评分,以及通过TRAP染色观察破骨细胞情况等指标评价CIA模型。类风湿性关节炎模型复制成功后将成模大鼠随机分成三组,即云南白药组(20只),甲氨蝶呤组(20只),关节炎组(20只),并设立正常对照组(20只)。云南白药组和甲氨蝶呤组都于第二次加强免疫后同时采取灌胃法给药,正常组和单纯模型组灌与等量生理盐水。给药后第一周,第二周,第三周,第四周处死动物,流式细胞术检测大鼠脾脏细胞CD4+CD25+Treg比例变化,关节HE染色法对双后足趾关节组织进行病理检查。免疫组化技术检测双后足趾关节中RANKL等表达情况,初步讨论云南白药对大鼠脾脏细胞CD4+CD25+Treg比例变化的干预作用及相关机制。[结果]模型组大鼠于注射胶原后第28天出现足趾关节显著肿胀,皮肤表面溃烂,大鼠出现行动不便等症状。足趾关节HE染色出现大量炎性细胞浸润及关节骨破坏。足趾关节TRAP染色显示关节炎模型组关节破骨细胞表达活跃。并结合关节炎评分标准,判定类风湿性关节炎模型制备成功。云南白药干预后流式细胞仪技术检测CIA大鼠脾脏中CD4+CD25+Treg比例,结果显示以给药后一周其比例逐渐升高,在用药后第二周时(21.24%±1.43%)该比例显著高于正常对照组(9.57%±0.22%)和关节炎组(10.84%±1.91%)(P0.05)。免疫组化技术检测到白药组用药后第7天关节骨中有RANKL表达(9±1.2),但表达数目有逐渐降低的走势,到用药后四周基本接近正常组(1.4±1.9)。[结论]]模型组大鼠于注射胶原后第28天出现典型的类风湿性关节炎症状,模型复制成功。CD4+CD25+Treg在云南白药干预后比例增加,第二周达最高峰,于第四周接近正常组,并且随着用药时间延长关节组织中RANKL表达量也逐渐降低。说明云南白药可能通过上调CD4+CD25+Treg水平,降低关节组织中RANKL表达,以而发挥抑制关节炎症和关节骨破坏吸收。关键词：云南白药论文甲氨喋林论文类风湿关节炎论文CD4+CD25+Treg论文RANKL论文
缩略词表5-6
中文摘要6-8
Abstract8-10
第一部分：建立SD大鼠类风湿性关节炎模型10-22
引言10-11
一、材料和策略11-15
二、实验结果15-19
三、讨论19-20
四、结论20-21
五、参考文献21-22
第二部分：云南白药对胶原性关节炎大鼠CD4+CD25+T细胞的干预作用探讨22-55
引言22-25
1、材料和策略25-31
2、实验结果31-46
3、讨论46-51
4、结论51-52
5、参考文献52-55
文献综述55-61