试议抗原基于磁性介孔材料负载多组分化学发光免疫检测学术

摘要：本论文的探讨工作中引入磁性介孔SBA-15、氧化石墨烯、CdS/SBA-15等纳米材料固定蛋白质，构建了几种新型多组分化学发光免疫传感器。主要探讨工作如下：1.设计了一种双管路的附有磁条的透明微型检测池，利用管路分流和磁分离技术建立了一种能同时检测癌胚抗原（CEA）和甲胎蛋白（AFP）的流动注射化学发光免疫浅析策略。将CEA和AFP的单克隆抗体包被在磁性介孔材料Fe_3O_4/SBA-15上作为捕获抗体（CEA-Ab1/Fe_3O_4/SiO_2、AFP-Ab1/Fe_3O_4/SiO_2）。将辣根过氧化物酶(HRP)标记的酶标二抗和HRP酶包被在金胶纳米粒子表面来制备信号放大型化学发光免疫检测探针(HRP/CEA-Ab_2/Au、HRP/AFP-Ab_2/Au)。两个透明的微型检测池并联在检测系统中。包被在磁性介孔Fe_3O_4/SiO_2上的CEA-Ab1/Fe_3O_4/SiO_2和AFP-Ab1/Fe_3O_4/SiO_2，相应的样品抗原及信号放大型探针HRP/CEA-Ab_2/Au和HRP/AFP-Ab_2/Au进行孵育，形成三明治式免疫夹心结构，被磁铁吸附在检测池内壁。免疫反应之后，洗涤管道，然后注入发光底物鲁米诺和H_2O_2，两个检测池内分别发生酶催化的鲁米诺-HRP-H_2O_2系统的化学发光。通过制约设在两个管路上的开关来制约鲁米诺和H_2O_2的流通，相继检测两个透明微型检测池中发生的酶促增强化学发光反应，以而实现两种待测物的同时检测。在最佳实验条件下，CEA和AFP的检测线性范围分别为1.0-80ng/mL与1.0-75ng/mL,检出限分别为0.25ng/mL和0.5ng/mL。2.提出了一种基于氧化石墨烯（GO）负载酶标记物的信号放大技术流动注射化学发光免疫浅析新策略，并实现了对AFP和CEA的联合检测。将Fe_3O_4/SBA-15作为载体，用于固定AFP和CEA的单克隆抗体，得到AFP-Ab1/Fe_3O_4/SiO_2和CEA-Ab1/Fe_3O_4/SiO_2。合成出表面羧基化的氧化石墨烯（GO-COOH），将HRP标记的酶标二抗包被在GO表面，分别制备出信号放大的酶标二抗（AFP-HRP-Ab_2/GO和CEA-HRP-Ab_2/GO）。将包被在磁性介孔Fe_3O_4/SiO_2上的CEA-Ab1/Fe_3O_4/SiO_2和AFP-Ab1/Fe_3O_4/SiO_2、相应待检抗原、负载在氧化石墨烯上的CEA-HRP-Ab_2/GO和AFP-HRP-Ab_2/GO进行孵育，形成三明治式免疫夹心结构，被磁铁吸附在检测池内壁。洗涤之后通入鲁米诺和H_2O_2，发光底物与酶标记物发生酶促增强的化学发光反应。通过制约设在两个管路上的开关来制约鲁米诺和H_2O_2的流通，相继检测两个透明微型检测池中发生的酶促增强化学发光反应，以而实现两种待测物的同时检测。在最佳实验条件下，AFP的线性范围为0.005-0.5ng/mL和0.5-100ng/mL，检测限为5.0pg/mL；CEA的线性范围为0.0025-1.0ng/mL和1.0-80ng/mL，检测限为2.5pg/mL。3.提出了一种新型的基于量子点/介孔二氧化硅（CdS/SBA-15）负载酶标记物的信号放大型化学发光免疫浅析法，用于对AFP和CEA的联合检测。将介孔SBA-15与CdS量子点结合形成一种新型的介孔复合材料CdS/SBA-15作为固定单克隆抗体（Ab1）的免疫载体。将HRP标记的酶标二抗（Ab_2）包被在磁珠上。将Ab1、相应待检抗原、Ab_2进行孵育，分别得到两种夹心式免疫复合物。将AFP和CEA的免疫复合物分别注入附有磁条的透明微型检测池中，被磁条吸附在检测池内壁。洗涤之后通入鲁米诺和H_2O_2，发光底物与酶标记物发生酶促增强的化学发光反应。通过开关来制约反应底物的流通，相继检测两个透明微型检测池中发生的酶促增强化学发光反应，实现两种待测物的同时检测。由于SBA-15大的比表面积以及CdS量子点对化学发光的增敏性，大大增强了检测的发光信号和灵敏度。关键词：流动注射化学发光论文甲胎蛋白论文癌胚抗原论文多组分检测论文免疫浅析论文肿瘤标志物论文
本论文由{#GetFullDomain},需要查抄袭率论文可以联系人员哦。

摘要4-6

ABSTRACT6-11

第一章 前言11-24

1.1 肿瘤标志物11-13

1.2 免疫传感器13-15

1.2.1 免疫传感器的原理与特点13

1.2.2 免疫传感器的主要类型13-15

1.2.2.1 电化学免疫传感器13-14

1.2.2.2 光学免疫传感器14-15

1.2.2.3 微质量免疫传感器15

1.2.2.4 热量检测免疫传感器15

1.3 多组分免疫浅析检测15-17

1.3.1 多标记物浅析方式16

1.3.2 空间分辨浅析方式16-17

1.4 纳米材料在免疫浅析中的运用17-19

1.4.1 纳米金胶粒子17-18

1.4.2 介孔二氧化硅18

1.4.3 氧化石墨烯18

1.4.4 量子点18-19

1.5 本论文基本思路及目的19-20