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摘要：目的探讨不同浓度雄激素对体外培养的人黄素化颗粒细胞中PTEN表达的影响,探讨雄激素引起颗粒细胞凋亡的可能机制,为多囊卵巢综合征的发病机制提供新的探讨思路。策略收集2011年11月-12月中南大学湘雅医院妇产科生殖中心经体外受精-胚胎移植(IVF-ET)或卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)治疗的患者卵巢黄素化颗粒细胞,体外培养48小时后分别加入不含血清的的不同浓度的睾酮培养基分成四组,空白对照组、10-7M组,10-6M组,10-5M组,继续培养24小时,用RT-PCR法检测颗粒细胞中PTEN mRNA的表达,DAPI染色法检测颗粒细胞凋亡情况。结果1、人黄素化颗粒细胞体外培养24小时后贴壁生长,48小时后细胞增殖显著,胞浆内含丰富的颗粒状物质,胞浆饱满,张力显著,细胞伸出细长伪足,细胞与细胞之间通过伪足紧密连接,呈典型颗粒细胞样特点,适宜行体外实验。2、体外培养人黄素化颗粒细胞中添加10-5M浓度的睾酮培养24小时后能推动颗粒细胞中PTEN的mRNA的表达,与10-7M组、10-6M组及空白对照组比较差别均有显著性(P0.05),10-7M组与10-6M组与空白对照组比较差别均无显著性(P0.05)；3、体外培养人黄素化颗粒细胞中添加10-5M浓度睾酮培养24小时后检查发现颗粒细胞凋亡指数为6.29±1.78%,与10-7M组、10-6M组及空白对照组比较差别均有显著性(P0.05),10-7M组与10-6M组与空白对照组比较差别均无显著性(P0.05)；结论1、PTEN在人黄素化颗粒细胞中有表达,高浓度睾酮(10-5M)推动颗粒细胞凋亡。2、高浓度睾酮(10-5M)能提升颗粒细胞中PTEN的mRNA水平,其诱导颗粒细胞凋亡的机制可能与PTEN介导的凋亡通路有关。关键词：睾酮论文人黄素化颗粒细胞论文PTEN论文凋亡论文
摘要4-6
ABSTRACT6-9
英文縮写词表9-10
第一章 前言10-13
第二章 材料与策略13-21
2.1 主要的仪器设备及耗材13
2.2 主要试剂13-15
2.3 策略15-20
2.4 结论20-21
第三章 结果21-26
3.1 一般临床结果21
3.2 原代黄素化颗粒细胞体外培养21-23
3.3 原代培养人黄素化颗粒细胞鉴定23
3.4 DAPI染色细胞凋亡结果的判定23-24
3.5 半定量RT-PCR鉴定不同浓度雄激素组处理后凋亡相关基因PTENmRNA的表达24-26
第四章 讨论26-30
4.1 人黄素化颗粒细胞的原代体外培养26-27
4.2 PTEN在卵巢颗粒细胞中的表达27
4.3 雄激素对颗粒细胞中PTEN的影响27-30
第五章 结论30-31