毛细管加压毛细管电色谱—质谱联用平台搭建和运用与细胞代谢组学如何

摘要4-7

ABSTRACT7-16

第一章 绪论16-31

1.1 加压毛细管电色谱概述16-26

1.1.1 分离原理16-17

1.1.2 仪器构造17-19

1.1.3 检测与联用技术19-23

1.1.4 pCEC 运用23-26

1.2 肺癌概述26-28

1.2.1 肺癌发病相关因素26-27

1.2.2 肺癌病理27-28

1.2.3 肺癌的临床检查28

1.3 代谢组学概述28-30

1.4 本探讨的作用与探讨内容30-31

第二章 pCEC-MS 接口设计与性能考察31-43

2.1 引言31-32

2.2 仪器与试剂32

2.2.1 仪器32

2.2.2 试剂32

2.3 实验策略32-33

2.3.1 标准品储备液的配制32

2.3.2 加压毛细管电色谱条件32-33

2.3.3 质谱条件33

2.4 实验内容与讨论33-41

2.4.1 接口设计33-36

2.4.2 系统结构36-37

2.4.3 流速的影响37-38

2.4.4 流动相盐离子的影响38-39

2.4.5 电压对物质保留时间的影响39-40

2.4.6 联用系统检测限40-41

2.4.7 联用系统重现性考察41

2.5 小结41-43

第三章 pCEC-MS 联用平台在肺癌代谢组学中的运用43-63

3.1 引言43

3.2 仪器与试剂43-45

3.2.1 仪器43-44

3.2.2 试剂44

3.2.3 样本的采集44-45

3.3 实验策略45-48

3.3.1 尿样预处理45

3.3.2 加压毛细管电色谱条件45-46

3.3.3 质谱条件46

3.3.4 数据预处理与方式识别46-47

3.3.5 差别代谢物变量的选择47

3.3.6 差别代谢物的鉴定47-48

3.4 结果与讨论48-60

3.4.1 柱上富集48-49

3.4.2 流动相组成的优化49-50

3.4.3 操作电压的优化50-51

3.4.4 梯度的优化51-52

3.4.5 策略学验证52-54

3.4.6 肺癌病人与正常人的代谢谱比较54-55

3.4.7 PCA 模型结果55-56

3.4.8 OPLS-DA 模型结果56-57

3.4.9 潜在标志物57-60

3.5 小结60-63

第四章 基于液相色谱-质谱联用技术的肺癌细胞代谢组学浅析63-73

4.1 引言63-64

4.2 仪器与试剂64

4.2.1 仪器64

4.2.2 试剂64

4.2.3 细胞来源64

4.3 实验策略64-66

4.3.1 细胞培养64

4.3.2 细胞提取策略64-65

4.3.3 上层提取物色谱条件65

4.3.4 下层提取物色谱条件65

4.3.5 质谱条件65

4.3.6 数据统计浅析65-66

4.4 实验内容与讨论66-72

4.4.1 细胞提取策略的优化66

4.4.2 浅析条件优化66-67

4.4.3 细胞代谢物谱图67-68

4.4.4 PLS-DA 模型结果68-69

4.4.5 代谢差别物69-72

4.5 小结72-73

第五章 探讨总结与展望73-75

5.1 主要结论73

5.2 探讨展望73-75